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ELISA實驗中洗板操作的關鍵注意事項
以下是ELISA實驗中洗板操作的關鍵注意事項,綜合多來源信息整理:
一、洗滌液處理
新鮮配制?
洗滌液需現配現用,避免絮狀物堵塞洗板機噴頭或造成花板現象。
推薦使用去離子水/蒸餾水稀釋濃縮液,吐溫20濃度控制在0.05%-0.2%(過高會解吸附抗體)。
溫度控制?
冬季需保持洗液溫度20-30℃,低溫易導致洗滌不凈。
二、手工洗板要點
操作規范?
加液量以剛滿反應孔為限(約200-300μL),避免孔間交叉污染。
甩板時需垂直翻轉120-150度,迅速干脆,禁止手腕搖擺旋轉。
拍干技巧?
使用無碎屑濾紙(非衛生紙),每次拍打更換區域,最后一次需拍干。
力度適中:過輕殘留多,過猛可能損壞板條。
三、洗板機使用
參數設置?
洗滌量350μL/孔,浸泡30-60秒,洗板4-5次(根據說明書調整)。
需檢查噴頭通暢性,殘留量應≤1μL/孔。
補充處理?
機洗后建議人工補洗1-2次,減少液體殘留。
四、通用注意事項
防止污染?
高濃度樣本孔與空白孔需間隔布局,甩液時優先處理低濃度孔。
洗板前兩遍需特別注意防溢。
時間控制?
每步洗滌靜置1-2分鐘,總洗滌時間不足會導致背景偏高。
板面維護?
保持酶標板濕潤,避免孔內干涸導致酶失活。
五、錯誤操作警示
禁止?:減少洗滌次數、縮短浸泡時間、重復使用吸水紙、混用不同品牌洗液。
避免?:洗板后長時間暴露空氣(顯色OD值會衰減)。
通過規范操作可顯著降低背景干擾,提高數據準確性。若出現花板現象,建議檢查洗液新鮮度及溫度。
注:以上資料僅供參考,不作為實驗依據,完整操作請以實說明為準,不同品牌可能存在細節差異?。
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