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以下是豬α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒的實驗使用說明摘要:
BS-4661 豬α半乳糖基抗原(α-gal)ELISA試劑盒 天津本生
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法,通過包被抗體捕獲樣本中的α-Gal抗原,再與酶標抗體形成復合物,經TMB顯色后測定OD值計算濃度。
二、試劑盒組成
預包被微孔板(48孔/96孔)
標準品(凍干粉,需用稀釋液重構)
酶標試劑、顯色劑(A/B液)、終止液
濃縮洗滌液(20-30倍)
三、樣本處理要求
樣本類型 處理方法
血清 室溫凝固后離心取上清(2000-3000轉/分,20分鐘)
血漿 EDTA/肝素抗凝,離心后取上清
組織勻漿 按1:9比例與PBS冰上研磨
保存條件 -20℃分裝,避免反復凍融
四、操作步驟
平衡試劑?:所有組分室溫平衡15-30分鐘
標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如78-5000pg/mL)
加樣?:
標準品/樣本各50μL加入對應孔
加入酶標試劑50μL,37℃孵育1-2小時
洗滌?:用1×洗滌液洗板3-5次,拍干
顯色?:加TMB避光反應10-20分鐘,終止后15分鐘內檢測
五、注意事項
避免孔板干燥或污染
顯色時間需嚴格控制
不同批號試劑不可混用
450nm波長讀取OD值,建議做復孔
六、性能參數
檢測范圍:125-4000pg/mL
批內/批間CV:<10%
回收率:85%-115%
注:以上資料僅供參考,完整操作請以試劑盒內附說明書為準。
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